ExpiCHO 表達(dá)培養(yǎng)基配方中包含 GlutaMAX-I™ 試劑?？芍苯邮褂?，無(wú)需添加劑?；瘜W(xué)成分明確的配方可實(shí)現(xiàn)高度的重現(xiàn)性和批間可靠性。為了獲得較高水平的瞬時(shí)蛋白表達(dá)，該培養(yǎng)基應(yīng)與匹配的培養(yǎng)基補(bǔ)料——ExpiCHO™ 補(bǔ)料配合使用，后者作為 ExpiFectamine™ CHO 轉(zhuǎn)染試劑盒（貨號(hào) A29129）。不推薦將 ExpiCHO 表達(dá)培養(yǎng)基用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞通常置于錐形瓶?jī)?nèi)，放在搖床平臺(tái)上，然后放入加濕的 CO₂ 細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)生長(zhǎng)。但是培養(yǎng)體積可以從多孔板中的 <1 mL 擴(kuò)展到生物反應(yīng)器中的 >10 L。

可以用其他培養(yǎng)基代替 ExpiCHO 培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)ExpiCHO-S細(xì)胞嗎？

不可以。ExpiCHO 表達(dá)系統(tǒng)能夠達(dá)到的產(chǎn)物滴度，這是因?yàn)樵撓到y(tǒng)的組分經(jīng)過(guò)優(yōu)化，互相配合，達(dá)到最佳的蛋白表達(dá)效果。ExpiCHO 培養(yǎng)基是一種兼容轉(zhuǎn)染的高密度生長(zhǎng)培養(yǎng)基，專門用來(lái)與 Gibco ExpiCHO 養(yǎng)料和 ExpiFectamine CHO 增強(qiáng)劑搭配使用。其他培養(yǎng)基無(wú)法與 ExpiCHO 系統(tǒng)匹配，可能最終會(huì)抑制蛋白表達(dá)。

我的 ExpiCHO 表達(dá)培養(yǎng)基（Cat.不。A2910002）被意外凍結(jié)。我還能使用它嗎？

本產(chǎn)品應(yīng)儲(chǔ)存在 2-8 攝氏度，不應(yīng)冷凍。意外冷凍本產(chǎn)品的最大問(wèn)題是其溶解度。如果本產(chǎn)品意外冷凍，我們建議將其放置在 2-8 度的環(huán)境中，讓其緩慢解凍過(guò)夜。如果產(chǎn)品已解凍并且沒(méi)有沉淀跡象，那么它應(yīng)該仍然可以使用，但我們不能保證有效性。

在轉(zhuǎn)染前一天將 ExpiCHO 傳代培養(yǎng)至 3-4 x 10E6/mL 時(shí)，您是否建議將細(xì)胞沉淀并重懸于新鮮的培養(yǎng)基中，或者簡(jiǎn)單地更換一些培養(yǎng)基以將它們分解到所需的細(xì)胞密度？

在轉(zhuǎn)染 ExpiCHO 細(xì)胞之前，無(wú)需在傳代培養(yǎng)過(guò)程中更換培養(yǎng)基。這將變得昂貴，并且不需要條件培養(yǎng)基。

您建議在用早期傳代時(shí)冷凍的新細(xì)胞替換 ExpiCHO 細(xì)胞之前使用多少次傳代？

為了在蛋白質(zhì)生產(chǎn)方面獲得最佳性能，我們建議在轉(zhuǎn)染前解凍 ExpiCHO 細(xì)胞并讓它們生長(zhǎng) 2-3 次傳代?？傮w而言，我們不建議使用超過(guò) ?20 代的細(xì)胞。